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星期 二
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·样品用量太多:杂质和腐殖酸含量过高的样品,可使得当降低样品的用量·样品中含有二价金属离子:可在裂解液中加入EGTA。MPBio土壤试剂盒。MP在研究土壤样本DNA纯化方法的过程中,针对土壤样本核酸纯化的三大难题:腐植酸含量高、微
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bedsoil、Salinesoil、Desertsoil。Yield(ng/mgsample):47.78+0.21、16.03+0.06、14.88+0.65、7.55+0.65、1.64+0.19。260/280:1.79+
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入RAase消化。问题7:A260/A230比值低怎么办?解决思路:·A230是多肽、芳香基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度,A230高表示样品中存在一些污染物。【1】蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。【2】杂质去除不干净:
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颗粒紧密结合,很难分离,经常会导致菌体裂解不完全,DNA条带弥散;并且土壤中还存在大量抑制剂,如腐殖酸等,导致提取的DNA纯度差,洗脱液有颜色。这些难题,选择MPBiomedicals***产品土壤基因组DNA提取试剂盒——SPI
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NAKitforSoil或FastDNASpinKitforSoil,按照土壤试剂盒提取protocol进行。有效裂解:采用介质E,介质E中研磨珠与菌体大小,可以有效裂解各种菌体细胞。去杂提纯:试剂根据微生物DNA提取而优化设计,