动物模型名称:胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:200~220g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分:0分:无明显病变;1分:呈局灶性分布,受累面积在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面积在30%-70%之间者;3分:呈弥漫性分布,受累面积在70%以上者。统计分析:每份标本在低倍视野(10×10)下依次选取左上、右上、左下、右下、中间5个视野(共1.5mm2)进行观察,测定并计算视野内小胆管伴纤维组织增生总面积。疾病动物模型建模实验室。静安区品牌疾病动物模型建模
自发性**动物模型:未经人为处理;自然发生;自发性**的总体评价--动物自发性**的病因往往是由动物的遗传特性决定的与人痒的病因有较大距离。各动物**生长速度差异较大很难在限定时间内获得大量生长均匀的荷瘤动物(tumor-bearinganimals)。因此,自发性**动物模型很少在抗**药物的常规筛选中广泛应用。2、诱发性**动物模型:在实验条件下:使用致*物(carcinogens);诱发动物发生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在实验条件下诱发动物发生**的动物模型,它是进行实验**学研究的常用方法。常用于验证可疑致*因素的作用也越来越多地应用干**发生机理的研究及防治效果的观察上,在**病因学、遗传学、生物学等方面的研究中有重要地位。由于诱发因素和条件可人为控制,诱发率远高于自然发病率故在**实验研究中优于自发瘤。用于诱发实验性**的动物种类很多,它们因种族不同而对相同致*因素有不同的反应性。常用的动物以哺乳动物为主,其中啮齿类动物的使用**多,应用**广,包括各种大鼠、小鼠、际鼠等。。黄浦区肺病疾病动物模型建模能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。
进而使一些生长因子受体磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周龄雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮肤。在DMBA涂抹一周后,每周两次将TPA(40nmol)施用到相同部位。模型验证:几周后,小鼠背部皮肤上出现色素沉着斑点。组织学研究表明,小鼠真皮组织中色素细胞积累,某些色素细胞表现出嵌套的形态学模式。缺点:化学诱导黑素瘤小鼠模型缺乏与人类疾病的临床相关性。另外,此类模型可用于研究阳光对黑色素细胞痔转化为侵袭性的黑色素瘤的过程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系统功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前应用多的模型。应用:移植接种的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位发展、转移的一些特点,多用于抗和转移药物评估。1同种移植模型同种移植模型是将小鼠黑素瘤细胞接种到具有相同遗传背景的小鼠中获得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。优点:同种移植模型具有免疫能力,可通过黑色素细胞与免疫细胞之间固有的相互作用来研究黑色素瘤与微环境的关系。
步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。上海东寰告诉您如何选择好的动物模型。
可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。构建人源移植瘤模型需要合适的免疫缺陷小鼠想知道如何选择?长宁区疾病动物模型建模价格
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缺点:该移植模型的原发出现与转移发生之间时间间隔短,不利于药物药效研究;且细胞为鼠源,与人类有一定的差异。2异种移植模型异种移植模型是将人类的细胞或组织移植入免疫缺陷型实验动物体内。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠,例如无胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般来说,免疫缺陷程度越高,成瘤性越好。的相关研究中,人源细胞系异种移植(cell-line-derivedxenograft,CDX)模型和患者组织异种移植(patient-derivedxenograft,PDX)模型已得到广泛应用。CDX模型方法:将5×106的人A375黑色素瘤细胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹侧的双侧,成功构建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法:有研究者将93个新鲜的患者组织切成2×2×2mm3碎片的大小,皮下接种6周大的NOD/SCID雌性小鼠,建立PDX模型。优点:保留了病人的组织学和遗传学特征,可模拟溃疡状态对人类黑色素瘤预后的影响。缺点:此模型移植后的潜伏期长,连续传代后鼠基质被人类基质替代,移植率可变,免疫系统受损,有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫细胞功能的缺乏。三、转基因小鼠模型可以通过异位表达基因,引入特定的致突变或灭活抑制基因来对小鼠进行转基因黑色素瘤模型的构建。静安区品牌疾病动物模型建模
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